实验方法:将Fluc mRNA(N1-methyl-pseU)分别封装在SM102-LNP及修饰了抗人CD3抗体 (克隆号: OKT3, 鼠源单克隆抗体, tcy8722太阳集团, A02199)的SM102-LNP中。使用100 ng封装的mRNA 与Jurkat细胞在含10% FBS的RPMI 1640培养基中37℃孵育24、48小时后,使用荧光素酶检测试剂盒(Promega,E4030)检测mRNA的表达。
实验结论:抗CD3抗体修饰的SM102-LNP显著提高了Fluc mRNA在Jurkat细胞中的递送效率,在24小时和48小时均表现出更高的荧光素酶表达水平。
实验方法:将eGFP mRNA(N1-methyl-pseU)分别封装在SM102-LNP中及修饰了抗人CD3抗体的SM102-LNP中。使用不同剂量(10-150 ng)封装的mRNA与原代T细胞孵育24小时。使用流式细胞仪检测eGFP的表达。W1、W2和W3表示不同的洗涤条件。
实验结论:抗CD3抗体修饰的SM102-LNP提高了eGFP mRNA在原代T细胞中的递送效率,在低剂量下效果更为显著。
将 Fluc mRNA(N1-methyl-pseU)分别封装在 SM102-LNP 和修饰有抗小鼠 CD3 抗体的 SM102-LNP 中;将含有 mRNA 的 LNP 以 0.3 mg/kg 的剂量经尾静脉注射至小鼠体内。24 小时后通过全身成像以及不同组织器官的成像来检测 Fluc mRNA 的表达和分布情况。
